Page 72 - Petelin, Ana, ur. 2024. Zdravje delovno aktivnih in starejših odraslih / Health of Working-Age and Older Adults. Zbornik povzetkov z recenzijo ▪︎ Book of Abstracts. Koper: Založba Univerze na Primorskem/University of Primorska Press

Vpliv čaja iz laškega smilja na prepustnost črevesne pregrade
ter translokacijo bakterij Salmonella Infantis

Katja Kramberger, Katja Kranjc, Darja Barlič-Maganja, Saša Kenig, Zala Jenko Pražnikar
Univerza na Primorskem Fakulteta za vede o zdravju, Izola, Slovenija

Uvod: Kronično sistemsko vnetje in disbioza črevesja, opaženi stanji pri debelosti in
drugih kroničnih boleznih, vplivata na funkcijo črevesne pregrade (ČP). Za obe stanji je
značilna povečana prepustnost ČP in s tem povezana translokacija bakterij. Bakterijska
translokacija, ki pomeni prehod viabilnih bakterij iz črevesja v zunajčrevesne prosto-
re, lahko vodi v razvoj sistemskih vnetnih stanj in s tem še dodatno spodbuja kronič-
no vnetje. Sestavine prehrane, kot so probiotiki, polifenoli, lipidi in beljakovine, lahko
izboljšajo funkcijo ČP bodisi z zaviranjem vnetja ali z neposrednim delovanjem na ČP.
Aromatična sredozemska rastlina laški smilj (Helichrysum italicum) predstavlja bogat vir
polifenolnih spojin. V naših predhodnih raziskavah smo že pokazali protivnetne učinke
čaja iz laškega smilja (ČLS), analiza transkriptoma črevesnih celic pa je pokazala poten-
cialne učinke tudi na samo integriteto ČP. V dotični raziskavi smo želeli potrditi vpliv
ČLS na ČP preko spremenjenega izražanja genov za proteine tesnih stikov. Prav tako
smo spremljali vpliv ČLS na transepitelno električno upornost (TEER) in sposobnost
zdravje delovno aktivnih in starejših odraslih | health of working-age and older adults
adhezije, invazije in translokacije bakterij Salmonella Infantis.
Metode dela: Za model prepustnosti ČP smo uporabili epitelne črevesne celice Ca-
co-2, gojene na porozni membrani insertov Transwell. Z merjenjem TEER pred in po
tretiranju celic smo preverjali celovitost celičnega monosloja. Celicam z ali brez treti-
ranja s ČLS smo inducirali vnetje s toplotno ubitimi (TUB) ali z živimi bakterijami S. In-
fantis. Po tretiranju smo izolirano RNA s postopkom reverzne transkripcije prepisali v
komplementarno DNA in preverili izražanje genov za izbrane proteine tesnih stikov z
verižno reakcijo s polimerazo v realnem času (RT-PCR). Za določanje števila translo-
ciranih bakterij S. Infantis smo po končani inkubaciji vzorčili gojišče v bazolateralnem
delu in nanesli serijske redčitve na Triptični soja-agar.
Rezultati: 24-urni tretma s TUB je znižal TEER celic Caco-2 za 60,0 %, medtem ko je
sočasen tretma s ČLS (0,2 v/v%) povzročil 51,3 % znižanje (p=0,0284). Pred-tretira-
nje s ČLS za 24 ur samo po sebi ni imelo učinka na TEER, medtem ko so po 24-urni iz-
postavitvi TUB celice pred-tretirane s ČLS imele skoraj 10 % manjše znižanje TEER v
primerjavi s celicami, ki niso bile pred-tretirane (p=0.0034). Nadalje je 24-urno pred-
-tretiranje celic s ČLS v koncentraciji 0,2 v/v% preprečilo translokacijo bakterij S. In-
fantis preko celičnega monosloja za 95 %. Kljub temu po 2-urni infekciji z bakterijami
med poskusi ni bilo značilne razlike v TEER.
Razprava in zaključki: Meritve celovitosti epitelija Caco-2 celic so pokazale, da ČLS
lahko izboljša integriteto ČP, porušeno s TUB. Slednje smo potrdili tudi s spremem-
bo izražanja genov tesnih stikov. Pred-tretiranje s ČLS pa je prav tako preprečilo tran-
slokacijo bakterij S. Infantis. Na osnovi rezultatov naše študije lahko sklepamo na po-
membno vlogo ČLS pri ohranjanju integritete ČP, zlasti pri vnetnih stanjih.
Ključne besede: laški smilj, integriteta črevesne stene, tesni stiki, vnetje, translokaci-
ja, Salmonella Infantis

72